I：Adagio-Allegro molto
第一乐章-序奏-慢板-不太快的快板，e小调，4/4拍子，奏鸣曲式。 此序奏部分颇为宏大，其主题与相继的主部快板部分有极其微妙的关系，担负一种连贯全曲的特殊任务，甚至可称之为全曲精神的中心旋律。乐章的引子部分开始由弦乐、木管、圆号陈述，描绘了美洲大陆新奇景象。之后由弦乐器、定音鼓和圆号竞相奏出强烈而热情的节奏，暗喻了美国那种紧张、忙碌的快节奏生活 ； 乐章的主部主题（e小调）贯穿了全曲的四个乐章，前半段在弦乐颤弓的伴奏下由圆号吹出，后半段经过发展由铜管乐器全奏。这个主题被认为和黑人灵歌《流吧，约旦河》有连带关系，也有人认为，切分音与五声音阶的进行与居住于匈牙利和波西米亚境内的马札儿民族固有的民俗音乐具有共通的性质。这一特殊主题靠着巧妙发展，转达了不同于以往音乐世界的“新世界”的消息， 具有强烈的震撼效果。德沃夏克当时背井离乡，乡愁蕴积，故而引用了他少年时期耳熟能详的民俗歌曲特质，以遣思乡念国的情怀。乐章中第二主题（g小调-G大调）透露出浓浓的乡愁，开始由长笛奏出，然后同样发展到铜管乐全奏。 发展部以第二主题为核心，由铜管乐器奏出，进行频繁转调，情绪颠簸、慌张。再现部第一主题更为激动不已（仍为e小调），第二主题更为悲切（#g小调-bA大调）。第一在铜管乐器的急躁演奏中结束。
II：Largo
第二乐章-最缓板，bD大调，4/4拍子，复合三段体。这个乐章原有《传奇》的标题，一连串庄严的和弦引出《回家》的旋律。这一乐章是整部交响曲中最为有名的乐章，经常被提出来单独演奏，其浓烈的乡愁之情，恰恰是德沃夏克本人身处他乡时，对祖国无限眷恋之情的体现。整个乐队的部分铜管在低音区合奏出充满哀伤气氛的几个和弦之后，由英国管独奏出充满奇异美感和神妙情趣的慢板主题，弦乐以简单的和弦作为伴奏，这就是本乐章的第一主题，此部分被誉为所有交响曲中最为动人的慢板乐章。在高音木管乐器演奏后，旋律接着由小提琴陈述。事实上，也正因为有了这段旋律，这首交响曲才博得全世界人民的由衷喜爱。这充满无限乡愁的美丽旋律，曾被后人填上歌词，而改编成为一首名叫《恋故乡》的歌曲，并在美国广泛流传、家喻户晓。本乐章的第二主题由长笛和双簧管交替奏出（#c小调，第二遍由大提琴奏出），旋律优美绝伦，在忽高忽低的情绪中流露出了一种无言的凄凉，仍是作者思乡之情的反映。第二主题过后，木管乐在忐忑不安的跳音上进行发展，铜管乐强烈奏出了《恋故乡》主题（A和弦-并隐藏着第一乐章的旋律）。最后乐曲转回bD大调，弦乐四重奏陈述《恋故乡》主题。在小提琴的极高音区衬托下，第二乐章结束。
III：Scherzo-Molto vivace
第三乐章 谐谑曲，这是民间舞蹈风格，从“海华沙的婚宴”中的印第安舞蹈中得到启发，舞蹈由快而慢地不停旋转。音乐有两个主题，第一主题轻快而活泼（e小调），带有跳跃的情绪；第二主题清丽、明快（E大调），富有五声音阶特色；两个主题彼此应和、模仿。乐章的三声中部主题（圆舞曲-C大调）悠长而婉转，是典型的捷克民间音乐风格。，表达了作者对童年往事的回忆。待到主部主题复述后，第一乐章的旋律再一次由圆号奏出，悲凉的气息再度袭来。
IV Allergo con fuoco
第四乐章 终曲，火辣的快板，奏鸣曲式，气势宏大而雄伟。这个总结性的乐章将前面乐章的主要主题一一再现，同时孕育出新的主题，彼此交织成一股感情的洪流，这是极端悲愤的“思乡曲”，并广泛用于广播电台与手机铃声，因此为人所知。乐章的主部主题由圆号、长号和小号共同奏出（e小调），威武而雄壮，后半段由小提琴和长笛回转连动；副部主题则是柔美、抒情性旋律（G大调），由单簧管奏出。发展部不以此乐章任何主题为中心，而是将《恋故乡》主题为选材，并进行频繁转调。再现部结束后经过发展之后，形成辉煌的结尾，“自新大陆”的旋律渐渐远去。
